TSK-GEL 離子交換色譜柱
TOSOH 提供了一系列用離子交換方式進行分析和分離生物分子的液相色譜柱.在任何一種離子交換模式既有甲基丙烯酸酯也有硅膠基的色譜柱。蛋白質、多肽、DNA和、核苷酸衍生出來的RNA 以及其他核酸片斷都是TSK-GEL陰離子交換色譜柱分析分離的典型樣品。基于聚苯乙烯基體材料的陰離子交換柱適合用于小分子量的糖類氨基酸、核酸堿基及小分子的備選。
特性 , 優點
新型 BioAssit 色譜柱
l 即使對較大的蛋白質也具有高容量>100KD,
l 取得相同樣品量的流動相耗量小
l 具有能提供快速傳輸的孔結構 , 更加尖銳的峰形了分析和分離
l 硬件為具有生物相容性的PEEK 柱 , 由于吸附產生的樣品損失較小
聚合物基的離子交換色譜柱
l 甲基丙烯酸酯骨架化學穩定性（pH2-12）
l 較大的孔尺寸 （1000A） 排出的蛋白質限為5000，000Da
l 無孔樹脂基體柱（(NPR)
l 機械性能穩定
l 耐堿、溶劑、改性劑表面劑重復清洗
l 對大多數生物聚合物使用相同住
l 快速QC 分析和工藝監測
l 降低溶劑消耗和 分析時間
硅膠基體的離子交換色譜柱
較小的孔尺寸2SW =125? 3SW=250? 適合 分析 較小的分子量的樣品如核苷、備選、兒茶酚、小肽。
TSK –GEL 陰離子交換色譜柱
l 填充了多孔結構和化學鍵合的樹脂TSK gel BIoAssist Q 柱 對分子量大小不同的蛋白質和核酸具有高交換容量。
l TSK-GEL DNA –NPR 柱可用于 PCR 片段的分析
l TSK-gel SuperQ－5pw 柱由于采用了 新的鍵合化學技術，所以比TSK-gel DEAE -5pw柱有更高的交換容量 。
TSK-GEL陽離子交換色譜柱
l TSK gel BIoAssist S 對中等和大分子量的蛋白質具有高度交換容量
l 因小孔徑和大比表面積TSK gelDEAE-2SW 與小分子和中等分子的蛋白質結合能力高于5pw 兩倍。
TSK 離子交換柱選擇
樣品類型 | 分子量范圍（Da） | Tsk-gel 柱 | pH范圍 |
氨基酸 多肽和蛋白 | |||
氨基酸 | < 2000 | SAX SCX | 1-14 1-14 |
肽和小蛋白 | <10000 | SCX SP-2SW CM-2SW DEAE-2SW QAE-2SW | 1-14 2-7.5 2-7.5 2-7.5 2-7.5 |
多肽和小蛋白 | 30000 | CM-3SW DEAE-3SW | 2-7.5 2-7.5 |
蛋白 | >1 | BioAssist S BioAssist Q SP-5PW DEAE-5pw CM-5PW
| 2-12 |
核酸 | |||
嘌呤和嘧啶 | DEAE-2SW SP-2SW | 2-7.5 2-7.5 | |
核苷 | SP-2SW DEAE-2SW | 2-7.5 2-7.5 | |
核苷酸 | DEAE-2SW | 2-7.5 | |
寡聚核苷酸 | DEAE-5PW DEAE-NPR DNA-NPR SUPERQ-5PW | 2-12 2-12 2-12 2-12 | |
DNA RNA和PCR產品 | DNA-NPR DEAE-NPR DEAE-5PW DEAE-3SW | 2-12 2-12 2-12 2-7.5 | |
其它分子 | |||
單雙糖 | Sugar AX1 ,AXG SCX SAX | 1-14 1-14 1-14 | |
酸 | OAPAK-A | 2-12 | |
下面是國內常用的離子交換色譜柱的應用實例
下圖是用陰離子離子交換色譜柱 TSK-GEL SUGAR AXG預柱反應后測定各類糖類纖維二糖、麥芽糖、乳糖、鼠李糖、來蘇糖、核糖、甘露糖、海藻糖、糖、半乳糖、木糖等
Sample: | 糖的標準品 |
Compound: | 1) Cellobiose, 2) Maltose, 3) Lactose, 4) Rhamnose, 5) Lyxose, 6) Ribose, 7) Mannose, 8) Fucose, 9) Arabinose, 10) Galactose, 11) Xylose, 12) Glucose |
Chromatographic conditions |
Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]: |
1) TSKgel Sugar AXG, 8640, 4.6*150(mmI.D.*mm), (um), 1 | |
Mobile Phase: A: 0.6 mol/l borate buffer (pH 7.7)B: 0.7 mol/l borate buffer (pH 7.25) | |
Temperature:70C | |
Detection:1) FS : ex.: 331 nm em.: 383nm | |
Injection vol:20ul | |
Sample load:Each of monosaccharide: 25 umol/lumol/l, disaccharide: 50umol/l | |
Note:Post column reactionReaction reagent: 2.5% 2-Cyanoacetamide solution | |
Source/reference:TOSOH Separation Report Vol.: No.: 42 p:7 - 7(2) ( ) | |
Title:Separation of saccharides on TSKgel Sugar AXG | |
下面的譜圖是采用OAPAK離子排除色譜柱，用離子排除色譜 和不同的檢測器，測定各種酸 酸、酒石酸、檸檬酸、蘋果酸、焦谷氨酸 、乳酸、醋酸、丁二酸 |
Sample: | 酸標準品 |
Compound: | 1) Pyruvic acid, 2) Tartaric acid, 3) Citric acid, 4) Malic acid, 5) Pyroglutamic acid, 6) Lactic acid, 7) Acetic acid, 8) Succinic acid |
Chromatographic conditions |
Column(s)[Column, Cat.No., Dimension, Particle Size, Number]: |
| 1) TSKgel OApak-P, 16654, 6.0*40(mmI.D.*mm), (um), 1 |
| 2) TSKgel OApak-A, 16653, 7.8*300(mmI.D.*mm), (um), 2 |
Mobile Phase: | 0.75 mM sulfuric acid |
Flow rate: | 0.8ml/min |
Temperature: | 60C |
Detection: | 1) CM 2) UV/VIS : 210nm 3) UV/VIS : 450nm |
Injection vol: | 20ul |
Sample load: | 1) 50ppm, 2) 500ppm, 3) 500ppm, 4) 500ppm, 5) 500ppm, 6) 1000ppm, 7) 2000ppm, 8) 1000ppm |
Note: | Peak 4': Degradation product of malic acid |
